1,、菌落:細菌培養(yǎng)后,由一個或幾個細菌繁殖而形成的一細菌集落,,簡稱CFU,。通常用個數(shù)表示。
2,、測試方法:沉降法,,即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿,經(jīng)48小時以上培養(yǎng),在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數(shù),,來評定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù),,并以此來評定無塵室的潔凈度。
3,、所用的儀器和設備
1)高壓消毒鍋:使用時參照文件GZ-ZL-SOP-066-00進行操作,。
2)恒溫培養(yǎng)箱:必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進行檢定。
3)培養(yǎng)皿:一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿,。使用前將培養(yǎng)皿置于121℃濕熱滅菌20分鐘,。
4、培養(yǎng)基:普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,。將培養(yǎng)基加熱熔化,,冷卻至約45℃在無菌操作條件下將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿,每皿約15m1,。待瓊脂培養(yǎng)基凝固后,,將培養(yǎng)基平皿放入30~35℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)數(shù)小時,若培養(yǎng)基平皿上確無菌落生長,,即可供采樣用,,制備好的培養(yǎng)基平皿應在2~8℃的環(huán)境中存放。
5,、測試步驟
1)采樣方法:將已制備好的培養(yǎng)皿放置在預先確定的取樣點,,打開培養(yǎng)皿蓋,使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時,,再將培養(yǎng)皿蓋上蓋后倒置,。
2)培養(yǎng),時間不少于48小時,。每批培養(yǎng)基應有對照試驗,,檢查培養(yǎng)基本身是否污染,可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng),。
3)菌落計數(shù):用肉眼直接計數(shù),,然后用5~10倍放大鏡檢查,有否遺漏,。若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊,,可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。
6,、注意事項
1)測試用具要做滅菌處理,,以確保測試的可靠性、正確性,。
2)采取一切措施防止人為對樣本的污染,。
3)對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。
4)由于細菌種類繁多,,差別甚大,,計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察,不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落,,并須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別,,必要時用顯微鏡鑒別。
5)采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量,,如發(fā)現(xiàn)變質(zhì),、破損或污染的應剔除。
7,、測試規(guī)則
1)測試狀態(tài)
(1)沉降菌測試前:被測試無塵室(區(qū))的溫濕度須達到規(guī)定的要求,,靜壓差、必須控制在規(guī)定值內(nèi),。被測試無塵室(區(qū))已消毒,。
(2)測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種,,并在報告中注明測試狀態(tài),。
(3)測試人員:測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服。靜態(tài)測試時,,室內(nèi)測試人員不得多于2個人,。
2)測試時間
(1)對單向流,如100級凈化房間內(nèi)及層流工作臺,,測試應在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于10分鐘后開始,。
(2)對非單向流,如10000級,、100000級以上的凈化房間,,測試應在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于30分鐘開始。
8沉降菌計數(shù)
1)最少采樣點數(shù)目:可按表1確定,。在滿足最少測點數(shù)的同時,,還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù),見表2,。
表1 最少采樣點數(shù)目